Рга анализ

Содержание

Рпга анализ крови: что это за исследование, когда назначают, насколько точна расшифровка результатов, какие еще есть тесты на сифилис?

Рга анализ

Исследование крови на сифилис РПГА методом проводится пациентам для подтверждения инфицирования бледными трепонемами и определения стадии болезни.

Прямая реакция пассивной гемагглютинации является одним из самых достоверных методик и относится к специфическим тестам. Чувствительность РПГА достигает 98-100% при соблюдении определенных условий.

При выдаче направления на анализ врач должен уведомить пациента о необходимости соблюдения правил. Невыполнение рекомендаций может привести к получению ложных результатов.

Значение при самых ранних сроках и при выздоровлении

Поскольку антитела, принадлежащие к классу иммуноглобулинов G, сохраняются в сыворотке крови, как правило, пожизненно, то даже после активного и успешного лечения сифилиса с последующим выздоровлением эти антитела остаются положительными.

Только в том случае, когда сифилис заподозрили и пролечили в «самом зародыше», через несколько дней после заражения, на стадии формирования твердого шанкра и регионарного лимфаденита, то тогда РПГА может быть отрицательной.

Тот факт, что и при вторичном сифилисе, и при третичном РПГА будет одинаково положительной, то это значит, что такое исследование нельзя использовать для дифференциальной диагностики стадий заболевания. С помощью РПГА также невозможно оценить эффективность лечения, поскольку при этом антитела всё равно будут циркулировать в крови.

Эффективность терапии необходимо оценивать с помощью других лабораторных анализов. Особенно высокие показатели, то и значительное разведение сыворотки крови пациента при проведении РПГА возникают при вторичном сифилисе, а также при ранней и скрытой форме этой болезни.

Какие заболевания поможет выявить?

Проверка на РПГА – специфический тест, использующийся для диагностирования сифилиса. Проверка крови с использованием этого метода дает возможность обнаружить заражение организма на любой стадии. Как известно, все типы сифилиса, можно разделить на две стадии – раннюю и позднюю.

РПГА тест позволяет определить:

  • сифилис первичный серонегативный;
  • сифилис первичный серопозитивный;
  • вторичный свежий сифилис;
  • вторичный скрытый сифилис;
  • вторичный рецидивный сифилис;
  • третичный активный сифилис;
  • третичный скрытый сифилис;
  • скрытый сифилис;
  • сифилис плода;
  • ранний врождённый сифилис;
  • поздний врождённый сифилис;
  • скрытый врождённый сифилис;
  • висцеральный сифилис;
  • сифилис нервной системы.

Несмотря на то, что РПГА тест, в первую очередь, ассоциируется именно с проверкой на сифилис, он применяется и для диагностирования других внутренних болезней и прочих бактериологических патологий.

Для проведения диагностики других болезней, заменяется реагент в который требуется добавить образцы крови.

Так для обнаружения кори проводится исследование с коревым маркером, для сальмонеллёза – сальмонеллёзным.

Методом РПГА пользуются для обнаружения дифтерии, шигеллеза и других заболеваний кишечника. Чувствительность этой реакции выше, чем у бактериального посева и дает возможность диагностировать нарушения в эндокринной системе, дизентерию и воспалительные процессы в толстой кишке.

Анализ не позволяет контролировать лечение сифилиса. Дело в том, что если человеческий организм был заражен бактерией бледной трепонемы единожды, то тест на РГПА будет выдавать положительные результаты всю его жизнь.

Изредка встречается ситуация, что результаты теста положительные, но бактерий сифилиса в организме нет, и никогда не было. Это называется ложноположительным результатом, и о возможных причинах этого явления будет сказано ниже. Но данный факт стоит учитывать, и прежде, чем будет поставлен диагноз, нужно оценить другие лабораторные данные.

РПГА

Найдено (1596 сообщений)

венеролог 13 февраля 2020 г. / Сергей

Здравствуйте. Доктор, 3 месяца сдавать на сифилис после момента полового акта или с момента возникновения язвы на члене? открыть (еще 2 сообщения)Последние 5:

15 февраля 2020 г. / Сергей

Сергей Куликов, Сходил сегодня в квд. Сдал названия РПР и РПГА

, к обеду сделали, оба отрицательные. А как вы написали содержимое язвы проверить так даже не предложили!

венеролог 27 декабря 2020 г. / Лана / Уфа

… перед операцией в КВД и каждый раз одно и то же. Ифа суммарно 0,278/0,277, ифаLgm отрицательно,ИФАLgg отрицательно, РПГА

отрицательно, МР отрицательно. Дают справку отрицательно. Я уже Незнаю что и думать почему у ифа суммарно показывает такую цифру.? Я … открыть

29 декабря 2020 г. / Лана

Доктор, В том то и дело когда сдаю ифа суммарно она говорят положительно 0,277/0,278 , а развернутый имуноглобулины и рпга

и мр все отрицательно. Это мне в КВД делают . Что может дать такую ифа суммарно? Это уже не первый раз года три так. Они говорят …

инфекционист 27 декабря 2020 г. / Лана

… . Я уже запуталась сдаю в КВД скрнинг перед операцией ифа суммарно 0,278/0,277, ифа Lgm отрицательно, Lgg отрицательно, РПГА

отрицательно, МР отрицательно. И это уже третий год такие результаты,. Говорят если имуноглобулины отрицательно ,то ифа суммарно … открыть
(еще 1 сообщение)Последние 5:
венеролог 25 декабря 2020 г. / Эллина / Москва

Здравствуйте! Подскажите, пожалуйста, может ли давать анализ IgM на сифилис давать ложноположительный результат из-за возможного заражения вич? То есть, если в данный… открыть (еще 4 сообщения)Последние 5:

26 декабря 2020 г. / Эллина

РПГА

, IgG, RPR — отрицательно. была в 3 клиниках и в КВД. везде говорят, что это ложноположительнвя реакция. Возможно из-за хламидиоза или герпеса, если они в активной стадии. скажите, пожалуйста, это действительно так? просто я боюсь, что если это …

венеролог 13 декабря 2020 г. / Ирина / Москва

Ифа суммарные отрицательно, ифа igg,igm отрицательно; Рмп отрицательно; рпга

положительный. Это сифилис? Никогда не болела, не лечилась, проявлений не было. открыть

венеролог 4 декабря 2020 г. / Пух

Здравствуйте, скажите пожалуйста ваше мнение,на сколько достоверны анонимные анализы в отличае от анализов по паспорту. Спасибо. открыть (еще 5 сообщений)Последние 5:

7 декабря 2020 г. / Аноним

Пух, РМП, ИФА, РПР, РПГА

венеролог 22 ноября 2020 г. / Ирина / Москва

Анализ на сифилис: Ифа качественно и количественно не обнаружено Рмп с кардиолипиновым антигеном отрицательно Рпга

обнаружено

У меня сифилис? Я два года в протоколах ЭКО, сдаю этот анализ каждый месяц, всегда был отрицательный открыть

22 ноября 2020 г. / Сергей Куликов

Нжуно дойти до врача, пройти осмотр, повторить (перепроверить) исследования (РПГА

, ИФА сумм., РИФабс.) и тогда уже решать.

венеролог 16 ноября 2020 г. / Аноним / Санкт-Петербург

… !В 2010 г выявлен нейросифилис поздний(диагноз поставлен после проведения пункции).Проведено 2 курса лечения пенициллином внутривенно.М/р 4+1/4, РПГА

4+,РИФ 4+.Доп лечение в 2011г +пункция повторно-без изменений. Доп.лечение в 2013г-все анализы без … открыть

Показания к проведению

РПГА тест обычно назначают на профилактических осмотрах и перед госпитализацией. Также это один обязательных тестов для тех, кто хочет стать донором. В первую очередь, эта проверка необходима при планировании беременности, и в случае выявления клинических признаков сифилиса. К последним относятся:

  • симметричные высыпания по всему телу;
  • увеличение лимфоузлов;
  • безболезненные язвочки в области половых органов;
  • обильное выпадение волос.

Проверка крови методом РПГА показана людям, которые контактировали с инфицированными сифилисом и тем, кому требуется подтверждение результатов, полученных при другом исследовании.

Назначение на исследование может дать терапевт, дермато-венеролог или другой узкий специалист. Если у вас есть желание пройти это обследование, то вы можете обратиться в любую поликлинику.

Анализ крови методом РПГА, также могут назначить для поверки на:

  • корь;
  • дифтерию;
  • столбняк;
  • коклюш;
  • сальмонеллёз.

Обязательно нужен при оформлении некоторых документов, например, санитарной книжки, и для подготовки к хирургическому вмешательству.

Нетрепонемные тесты

Реакция Вассермана- РВ, RW

, в среднем, становится положительной на 4-6 неделе заболевания. С увеличением поступления возбудителя сифилиса в кровь растет и титр RW. Своего максимума он достигает во вторичном рецидивном периоде сифилиса. При поздних формах заболевания реакция Вассермана нередко становится отрицательной.

Результат реакции Вассермана определяется наличием или отсутствием гемолиза. RW резко положительная — ++++, полная задержка гемолиза, RW положительная -+++, значительная задержка гемолиза, слабоположительная rw -++, +- сомнительная RW- частичная и соответственно незначительная задержка гемолиза. Отрицательная RW — полный гемолиз.

Недостатком RW является ее неспецифичность, т.е. реакция Вассермана становится положительной при отсутствиии сифилиса. Такой анализ называется ложноположительный.

Реакция Вассермана может быть ложноположительной при различных заболеваниях и состояниях — болезни соединительной ткани ( системная красная волчанка, системная склеродермия, дерматомиозит), ревматоидный артрит, туберкулез, онкология, болезни крови, заболевания сердечно-сосудистой системы — инфаркт миокарда, сахарный диабет, заболевания почек, беременность , употребление лекарственных препаратов и т.д.

Из-за неспецифичности реакции Вассермана, ее ложных результатов также используются другие реакции.

Реакция микропреципитации (РМП)

и ее аналоги:
RPR тест — Rapid Plasma Reagins и тест

VDRL

Что такое анализ крови на РПГА

Рга анализ

Несмотря на то что РПГА анализ крови применяется уже более 10 лет, это тестирование до сих пор не утрачивает актуальности.

При помощи процедуры можно выявить разные патологические процессы, но чаще направление на анализ выдается при подозрении на сифилис и инфекционные заболевания органов желудочно-кишечного тракта.

При выдаче направления на исследование нужно разобраться в том, как сдавать кровь и насколько точным является тестирование.

Особенности анализа

Из 10 человек расшифровку анализа крови РПГА знают не более половины. Под этой аббревиатурой подразумевается реакция пассивной гемагглютинации. Методика применяется для выявления внутренних патологических процессов, но особенно она эффективна при подозрении на сифилис.

Это обусловлено тем, что тест точно определяет антитела бледной трепонемы – микроорганизма, провоцирующего развитие сифилиса. При попадании в здоровый организм этого возбудителя иммунная система начинает активно вырабатывать антитела против него. Если тестирование показало присутствие возбудителя, пациенту нужно незамедлительно сдать дополнительные анализы на сифилис.

Условно тестирование можно разделить на 2 типа:

  • специфическое;
  • неспецифическое.

Классификация варьируется от типа антител, которые были выявлены в сыворотке крови. Главное преимущество анализа крови на РПГА заключается в том, что при помощи него можно выявить заболевание, вне зависимости от того, на каком этапе оно находится.

Преимущества РПГА

Тест РПГА проводят во всем мире не только из-за высокой точности и достоверности, но и из-за следующих достоинств:

  • процедура отличается простотой. Все, что необходимо сделать пациенту, – сдать кровь;
  • отсутствие необходимости использования специального дорогостоящего оборудования;
  • быстрая расшифровка. Обычно результат оглашается уже через сутки после сдачи биоматериала.

Показания к тестированию

В целях профилактики медики рекомендуют сдавать кровь на РПГА каждый год. Абсолютными показаниями к проведению такого тестирования являются:

  • проявление симптомов сифилиса. Основные признаки этого заболевания – возникновение эрозий и язв на кожном покрове (в особенности в области половых органов), увеличение лимфоузлов, частичное поредение волосяного покрова;
  • появление симптомов алопеции разных видов (патологическое облысение);
  • незащищенный половой контакт с предполагаемым носителем болезни.

Также тестирование в обязательном порядке назначается людям, которые хотят сдавать кровь как доноры. Кроме вышеперечисленных ситуаций, подобный анализ назначается при оформлении медкнижки и при определении человека в стационар. Также медик может выписать направление на РПГА анализ при подозрении на дифтерию, дизентерию или сальмонеллу.

Что показывает анализ

В большинстве случаев положительный результат РПГА указывает на сифилис врожденной или приобретенной формы. Также при помощи тестирования можно обнаружить следующие патологии:

  • вирус иммунодефицита человека;
  • гепатит;
  • возвратный брюшной тиф;
  • туберкулез легких;
  • дифтерия;
  • коклюш;
  • воспалительные поражения слизистых оболочек ротовой полости и гениталий;
  • формирование новообразований злокачественного происхождения;
  • мононуклеоз инфекционной природы;
  • диффузные поражения соединительных тканей;
  • венерические заболевания.

Чтобы тестирование показало достоверный результат, сдавать биоматериал нужно, соблюдая все врачебные рекомендации. В противном случае возбудитель может быть не обнаружен.

Многих интересует вопрос, почему при подозрении на сифилис назначается именно анализ РПГА. Популярность такого тестирования в диагностике этой опасной болезни обусловлена его достоверностью. Медики уверяют, что анализ показывает правильный результат в 99% случаев.

Анализ крови на микрореакцию

При отсутствии антител бледной трепонемы реакция агглютинации не произойдет, что говорит о том, что человек здоров.

Стоит учитывать, что чувствительность такого теста очень высока, поэтому обнаружить возбудитель сифилиса удастся даже на скрытых стадиях заболевания.

Сдачу образца на такое тестирование назначают и при подозрении на другие болезни, например, коклюш или иерсиниоз. Востребованность анализа обусловлена тем, что по сравнению с другими серологическими тестированиями он более чувствителен, что увеличивает вероятность получения достоверного результата.

Как проводится процедура

Для осуществления анализа подходит только венозная кровь. Чтобы тестирование показало точный результат, пациенту требуется подготовиться к нему и придерживаться следующих рекомендаций:

  • кровь сдают исключительно на голодный желудок, поэтому есть можно не позднее, чем за 10 часов до процедуры. Единственное, что допускается – выпить утром стакан воды;
  • за 3 часа до забора крови нельзя курить;
  • если пациенту назначен прием лекарственных средств на постоянной основе, об этом нужно оповестить врача, который будет проводить расшифровку анализа.

В большинстве случаев расшифровка результата занимает не более суток, но иногда длится до 4 дней. Срок может незначительно меняться в зависимости от лаборатории и типа используемого оборудования.

Расшифровка результата

Анализ проводится путем добавления к образцу специального реактива. При наличии в крови бледной трепонемы происходит реакция агглютинации, и эритроциты выпадают в осадок. По числу склеенных эритроцитов можно делать выводы о том, сколько антител присутствует в образце.

Результаты тестирования оцениваются по 4-балльной системе, по размеру сформировавшейся пленки. При появлении реакции агглютинации эритроциты остаются на поверхности лунки, образуя собой «зонтик». При отрицательном результате они опускаются вниз и скапливаются на дне в центре лунки.

Результат тестирования расшифровывается таким образом:

  • «-» – отрицательный результат. При нем красные кровяные тельца опускаются на дно, образуя компактный осадок;
  • «1+» – неоднозначная реакция. Эритроциты формируют неплотный осадок с нечеткими краями и просветом в середине;
  • «2+» – слабоположительная реакция. Внизу лунки появляется пленочка, образуя плотное кольцо с выраженным просветлением в центре;
  • «3+» – положительная реакция. Красные кровяные тельца почти целиком застилают лунку, при этом вокруг осадка образуется четкое кольцо;
  • «4+» – положительная реакция. При РПГА 4+ эритроциты формируют зонтик и равномерно застилают лунку.

Вот как могут выглядеть результаты теста РПГА

Положительный результат

Если тестирование дало положительную ответную реакцию, это говорит о присутствии в организме возбудителя болезни. В этом случае пациенту назначают дополнительные лабораторные и инструментальные анализы, отталкиваясь от которых можно будет подтвердить или опровергнуть наличие заболевания.

При положительном результате сдать анализ РПГА необходимо провести человеку, с которым инфицированный вступал в половой контакт. Стоит учитывать, что примерно в 5% случаев анализ РПГА дает ложноположительный результат. Чаще всего это связано с игнорированием правил подготовки.

Также ложноположительная реакция может проявиться в следующих случаях:

  • формирование онкологических новообразований;
  • гепатит разных форм;
  • ВИЧ.

В редких случаях ложноположительная реакция является признаком беременности. Отличительная особенность ложноположительного ответа – он сопровождается низким титром. Также стоит учитывать, что анализ может быть положительным, если пациент уже был болен сифилисом, но прошел успешное лечение.

Отрицательный результат

Отрицательная реакция РПГА говорит о том, что:

  • возбудитель сифилиса отсутствует в организме;
  • с момента инфицирования прошло менее 3-х недель. На столь раннем этапе иммунная система не начинает выработку антител;
  • неправильное проведение забора крови.

Если врач подозревал сифилис у пациента, но тестирование показало отрицательный результат. Через некоторое время рекомендуется сдать анализ повторно, чтобы убедиться в отсутствии патогенных микроорганизмов в сыворотке крови.

Насколько достоверен анализ

В ходе клинических исследований было выявлено, если забор крови осуществлялся должным образом и пациент соблюдал все правила по подготовке к процедуре, анализ не покажет ложный результат.

Если РПГА показало положительную реакцию, вероятность того, что человек является носителем сифилиса, составляет более 97%. Что касается ложноположительного ответа, то он может проявиться, если тестирование осуществлялось во время инфекционного заболевания или другого патологического состояния.

Заключение

Сегодня реакция пассивной агглютинации является преимущественной и по результативности превосходит все остальные тестирования.

Несмотря на то что методика чаще всего применяется для обнаружения антител бледной трепонемы, при помощи нее можно выявить и другие заболевания инфекционного происхождения.

Важно помнить, что результат тестирования зависит не только от методики проведения теста, но и от того, насколько правильно пациент подготовится к процедуре.

Серологические реакции: виды, использование

Рга анализ

Лабораторная диагностика практически всех инфекционных заболеваний основана на выявлении в крови больного антител, которые вырабатываются на антигены возбудителя, методами серологических реакций. Они вошли во врачебную практику с конца девятнадцатого – начала двадцатого века.

Развитие науки помогло определить антигенную структуру микробов и химические формулы их токсинов. Это позволило создать не только лечебные, но и диагностические сыворотки.

Их получают путем введения ослабленных возбудителей лабораторным животным.

После нескольких дней выдержки из крови кроликов или мышей готовят препараты, используемые для идентификации микробов или их токсинов, используя серологические реакции.

Внешнее проявление такой реакции зависит от условий ее постановки и от состояния антигенов в крови больного. Если частички микробов нерастворимы, то они осаждаются, лизируются, связываются или иммобилизуются в сыворотке. Если антигены растворимы, то проявляется феномен нейтрализации или преципитации.

Реакция агглютинации (РА)

Серологическая реакция агглютинация является высокоспецифичной. Она проста в исполнении и достаточно наглядна, чтобы быстро определить наличие антигенов в сыворотке крови больного. Ее используют для постановки реакции Видаля (диагностика брюшного тифа и паратифа) и Вейгля (сыпной тиф).

Она основана на специфическом взаимодействии между антителами человека (или агглютининами) и микробными клетками (агглютеногенами). После их взаимодействия образуются частицы, которые выпадают в осадок. Это и есть положительный признак. Для постановки реакции могут использоваться живые или убитые микробные агенты, грибы, простейшие, клетки крови и соматические клетки.

Химически реакция разбита на два этапа:

  1. Специфическое соединение антител (АТ) с антигенами (АГ).
  2. Неспецифическая – осаждение конгломератов АГ-АТ, то есть образование агглютината.

Реакция непрямой агглютинации (РПГА)

Данная реакция обладает большей чувствительностью, чем предыдущая. Ее используют для диагностирования заболеваний, вызываемых бактериями, внутриклеточными паразитами, простейшими. Она настолько специфична, что позволяет обнаружить даже очень низкую концентрацию антител.

Для ее постановки используют очищенные бараньи эритроциты и красные кровяные тельца человека, предварительно обработанные антителами или антигенами (это зависит от того, что именно лаборант хочет найти). В некоторых случаях человеческие эритроциты обрабатывают иммуноглобулинами.

Серологические реакции эритроцитов считаются состоявшимися, если произошло их осаждение на дно пробирки. О положительной реакции можно говорить, когда клетки располагаются в виде перевернутого зонтика, занимая все дно.

Отрицательная реакция засчитывается, если эритроциты осели столбиком или в виде пуговки в центре дна.

Серологические реакции этого типа служат для выявления крайне малых частиц антигенов. Это могут быть, например, белки (или их части), соединения белков с липидами или углеводами, части бактерий, их токсины.

Сыворотки для проведения реакции получают путем искусственного заражения животных, обычно кроликов. Таким методом можно получит абсолютно любую преципитирующую сыворотку. Постановка серологических реакций преципитации похожа по механизму действия на реакции агглютинации.

Антитела, содержащиеся в сыворотке, соединяются с антигенами в коллоидном растворе, образуя крупные белковые молекулы, которые осаждаются на дно пробирки или на субстрат (гель). Этот способ считается высокоспецифичным и может обнаружить даже ничтожно малые количества вещества.

Используется для диагностики чумы, туляремии, сибирской язвы, менингита и других заболеваний. Кроме того, задействован в судебно-медицинской экспертизе.

Реакция преципитации в геле

Серологические реакции можно проводить не только в жидкой среде, но и в агаровом геле. Это называется метод диффузной преципитации. С его помощью изучают состав сложных антигенных смесей.

Этот способ основан на хемотаксисе антигенов к антителам и наоборот. В геле они движутся навстречу друг другу с разной скоростью и, встречаясь, образуют линии преципитации.

Каждая линия – один комплект АГ-АТ.

Реакция нейтрализации экзотоксина антитоксином (РН)

Антитоксические сыворотки способны нейтрализовать действие экзотоксина, который вырабатывают микроорганизмы. На этом и основаны данные серологические реакции. Микробиология использует этот способ для титрования сывороток, токсинов и анатоксинов, а также определения их лечебной активности. Сила нейтрализации токсина определяется условными единицами – АЕ.

Кроме того, благодаря этой реакции можно определить видовую или типовую принадлежность экзотоксина. Это применяется при диагностике столбняка, дифтерии, ботулизма. Исследование можно проводить как «на стекле», так и в геле.

Реакция лизиса (РЛ)

Иммунная сыворотка, которая попадает в организм больного, обладает, кроме своей основной функции пассивного иммунитета, еще и лизирующими свойствами.

Она способна растворять микробные агенты, клеточные чужеродные элементы и вирусы, поступающие в организм больного.

В зависимости от специфичности входящих в состав сыворотки антител выделяют бактериолизины, цитолизины, спирохетолизины, гемолизины и другие.

Эти специфические антитела называются “комплемент”. Он содержится практически во всех жидкостях тела человека, имеет сложную белковую структуру и крайне чувствителен к повышению температуры, встряхиванию, действию кислот и прямых солнечных лучей. Но в высушенном состоянии способен сохранять свои лизирующие свойства до полугода.

Существуют такие виды серологических реакций этого типа:

– бактериолиз;

– гемолиз.

Бактериолиз проводят, используя сыворотку крови пациента и специфическую иммунную сыворотку с живыми микробами. Если в крови присутствует достаточное количество комплемента, то исследователь увидит лизис бактерий, и реакция будет считаться положительной.

Вторая серологическая реакция крови заключается в том, что взвесь эритроцитов больного обрабатывают сывороткой, содержащей гемолизины, которые активизируются только в присутствии определенного комплимента. Если таковой имеется, то лаборант наблюдает растворение красных клеток крови.

Данная реакция широко используется в современной медицине для определения титра комплемента (то есть его наименьшего количества, провоцирующего лизис эритроцитов) в сыворотке крови и для постановки анализа на связывание комплемента.

Именно этим способом проводится серологическая реакция на сифилис – реакция Вассермана.

Реакция связывания комплемента (РСК)

Эта реакция используется для того, чтобы обнаружить в сыворотке крови больного антитела к инфекционному агенту, а также с целью идентифицировать возбудителя по его антигенной структуре.

До этого момента мы описывали простые серологические реакции. РСК считается сложной реакцией, так как в ней взаимодействуют не два, а три элемента: антитело, антиген и комплемент. Суть ее заключается в том, что взаимодействие между антителом и антигеном происходит только в присутствии белков комплимента, которые адсорбируются на поверхности образовавшегося комплекса АГ-АТ.

Сами антигены, после присоединения комплемента, подвергаются существенным изменениям, которые и показывают качество проведенной реакции. Это может быть лизис, гемолиз, иммобилизация, бактерицидное или бактериостатическое действие.

Сама реакция происходит в две фазы:

  1. Образование комплекса антиген-антитело, которое визуально не заметно исследователю.
  2. Изменение антигена под действием комплемента. Эта фазу чаще всего можно отследить невооруженным глазом. Если же визуально реакции не видно, то используют дополнительную индикаторную систему, позволяющую выявить изменения.

Индикаторная система

Данная реакция основана на связывании комплемента. В исследуемую пробирку спустя час после постановки РСК добавляют очищенные эритроциты барана и гемолитическую сыворотку, не содержащую комплемента.

Если в пробирке остался несвязанный комплемент, то он присоединится к комплексу АГ-АТ, образованному между бараньими клетками крови и гемолизином, и вызовет их растворение. Это будет означать, что РСК отрицательна.

Если эритроциты остались целыми, то, соответственно, реакция положительная.

Реакция гемагглютинации (РГА)

Существуют две принципиально разные реакции гемагглютинации. Одна из них – серологическая, она используется для определения групп крови. В этом случае эритроциты взаимодействуют с антителами.

А вторая реакция не относится к серологическим, так как красные кровяные тельца реагируют с гемагглютининами, продуцируемыми вирусами. Так как каждый возбудитель действует только на конкретные эритроциты (куриные, бараньи, обезьяньи), то можно считать эту реакцию узкоспецифичной.

Понять, положительная реакция или отрицательная, можно по расположению клеток крови на дне пробирки. Если их рисунок напоминает перевернутый зонтик, значит, искомый вирус присутствует в крови больного. А если все эритроциты сложились наподобие монетного столбика, то искомых возбудителей нет.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)

Это высокоспецифичная реакция, позволяющая установить вид, тип вирусов или наличие специфических антител в сыворотке крови пациента.

Суть ее заключается в том, что антитела, добавленные в пробирку с исследуемым материалом, препятствую осаждению антигенов на эритроцитах, тем самым останавливая гемагглютинацию. Это и является качественным признаком наличия в крови специфических антигенов к конкретному искомому вирусу.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

В основе реакции лежит способность выявлять комплексы АГ-АТ при люминесцентной микроскопии после их обработки флюорохромными красителями. Это метод прост в обращении, не требует выделения чистой культуры и занимает мало времени. Он незаменим для экспресс-диагностики инфекционных заболеваний.

В практике эти серологические реакции делятся на два вида: прямые и непрямые.

Прямая РИФ производится с антигеном, который заранее обработан флюоресцирующей сывороткой. А непрямая заключается в том, что сначала препарат обрабатывают обычным диагностикумом, содержащим антигены к искомым антителам, а затем повторно наносится люминесцентная сыворотка, которая специфична к белкам комплекса АГ-АТ, и микробные клетки становятся заметны при микроскопии.

Серологическое исследование крови: показания и подготовка, методы

Рга анализ

Объект серологии — антигены и антитела

Серологическое исследование (СИ) основано на способности антигенов и антител связываться друг с другом. СИ позволяет с точностью выявить наличие у пациента определённого вируса либо бактерии, группу крови и резус, реактивность организма к антибиотикам, аутоиммунные заболевания, гормональные нарушения, индивидуальную специфичность белков, определить эффективность терапии.

Система иммунитета борется с проникающими в организм болезнетворными микробами (антигенами) при помощи антител, при этом создавая к каждому из вирусов, паразитов либо бактерий свой определённый тип защиты.

Антиген и антитело подходят друг другу как замочная скважина и ключ, при встрече они непременно связываются. Эта серологическая реакция позволяет выявлять различные виды антител либо антигенов.

Способность иммунитета вырабатывать особые вещества, нейтрализующие вредоносные частицы, была известна учёным давно. Но увидеть реакцию антиген-антитело в лабораторных условиях удалось только в конце XIX века. Было обнаружено, что в результате образования связки, комплексы выпадают в осадок, образуя хлопья либо помутнение.

Такие реакции получили названия агглютинации и преципитации. В XX веке серология — наука о свойствах сыворотки, стремительно развивалась, обнаруживались новые методы диагностирования на основе реакций антиген-антитело.

На сегодняшний день существует множество способов выявления иммунных комплексов, а СИ являются незаменимым звеном в диагностике, лечении, создании новых медицинских препаратов и вакцин.

Показания к проведению анализа

Серологические исследования широко применяется в акушерстве

Серологические исследования сопровождают современного человека на протяжении всей жизни. Первые анализы на выявление определённых антител проводятся, когда малыш находится ещё в утробе.

Беременная женщина сдаёт кровь на различные СИ для определения возможного резус-конфликта либо инфекций, способных навредить вынашиваемому плоду.

Когда ребёнок появляется на свет, его ожидают серологические исследования, позволяющие диагностировать врождённые заболевания. Впоследствии анализы сдаются по следующим причинам:

  • вирусные, бактериальные, паразитарные инфекции;
  • выявление активности, стадии развития болезни;
  • гормональные патологии;
  • бесплодие;
  • аутоиммунные заболевания;
  • нарушение обмена веществ;
  • аллергии;
  • онкологические заболевания;
  • планирование беременности, период вынашивания, патологии беременных;
  • выявление ревматоидного фактора;
  • определение группы крови и резус-фактора;
  • эффективность терапии при различных болезнях;
  • эффективность вакцинации;
  • предоперационный и постоперационный период при необходимости оценки уровня некоторых антител;
  • изучение иммунного состояния организма.

Подготовка к исследованию

Прием препаратов желательно отменить накануне теста

Так как серологические исследования охватывают широкий спектр анализов, в каждом конкретном случае может понадобиться определённая подготовка, но существуют общие правила сдачи серологического теста:

  • За сутки до исследования следует ограничить в рационе жирное и жареное, исключить алкоголь.
  • Последний приём пищи должен завершиться за 10 — 12 часов до анализа.
  • В день сдачи крови не следует употреблять кофе, чай либо иные напитки. Можно в небольшом количестве пить чистую воду.
  • Лекарственные средства перед анализом исключаются. Если приём отменить невозможно, необходимо предоставить врачу полный перечень препаратов, в том числе витаминов, пероральных контрацептивов.
  • Все другие исследования либо медицинские манипуляции проводятся после СИ.
  • Курение рекомендуется прекратить за 12 часов до взятия образца крови.
  • В предыдущий день следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, а перед исследованием желательно 15 минут посидеть в полном покое.
  • СИ назначаются на утреннее время и сдаются натощак.

Методы проведения серологического исследования

В серологии может применяться большое число методов

Все методики определения комплексов антиген-антитело (Аг-Ат) основываются на использовании известного Аг либо Ат в поиске неизвестного. Если необходимо обнаружить Аг, необходимы диагностические иммунные сыворотки с содержанием специфических Ат. Если целью СИ является выявление Ат, используются диагностикумы — взвеси, содержащие определённые Аг.

Серологические анализы могут отражать качественный либо количественный результат. При качественном исследовании итог может быть отрицательный или положительный, то есть искомый элемент либо обнаружен, либо нет. Количественный итог выражается в виде числового значения либо знаками «+» (обычно от одного до четырёх).

Непрямая гемагглютинация — один из методов диагностики

Методы серологических исследований:

  • Агглютинация. Связывание Ат с Аг с последующим формированием хлопьев либо осадка. Применяются прямые, непрямые, развёрнутые, ориентировочные реакции, позволяющие выявить антитела в сыворотке.
  • Гемагглютинация. Используются эритроциты с адсорбированными на них Аг либо Ат, которые склеиваются с соответствующими Ат и Аг. Образуемые комплексы выпадают в виде фестонного осадка.
  • Преципитация. Образование комплекса Аг-Ат с последующим осаждением в виде помутнения, именуемого преципитатом.
  • Коагглютинация. Выявление Аг при помощи Ат, адсорбированных на белке клеток стафилококка.
  • Торможение гемагглютинации. Ат иммунной сыворотки подавляют вирусные Аг, в итоге вирусы теряют способность склеиваться с эритроцитами.
  • Непрямая реакция Кумбса. Определяются Ат к поверхностным Аг эритроцитов.
  • Кольцепреципитация. Проводится на основе иммунной сыворотки с наслоением растворимого Аг.
  • Двойная радиальная иммунодиффузия. Реакция основана на диффундировании компонентов антисыворотки и Аг в лунках агара либо агарозы.
  • Реакция связывания комплемента. Связь Аг и Ат сопровождается адсорбцией комплемента, в качестве индикатора используются эритроциты барана и Ат к ним в составе гемолитической сыворотки.
  • Нейтрализация. Основана на нейтрализации вирусного агента антителами.
  • Реакции, основанные на маркировании Ат и Аг флуоресцентным либо ферментным составом — иммунофлюорисцентный (РИФ) и иммуноферментный (ИФА) методы.

Иммунофлюорисцентный метод

«Свечение» в темнопольном микроскопе

Данный метод основан на использовании Ат, меченных флуоресцентным веществом. Чаще всего в качестве метки используется флуоресцеинизотиоционат, обладающий зелёным свечением в лучах ультрафиолета. Результат анализа оценивается по степени яркости свечения.

Может быть использован ручной метод определения при помощи люминесцентного микроскопа, оптического микроскопа с люминесцентной насадкой, а также автоматический способ с применением микрочипового цитомера, проточного цитомера либо роботизированного флуоресцентного микроскопа.

РИФ проводится прямым и непрямым методом. Прямой способ означает непосредственное связывание сорбированного Аг с меченым Ат. Непрямой метод подразумевает использование немаркированных Ат для связки с Аг, а затем добавление меченых Ат, что позволяет избежать неспецифических реакций.

Иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ как метод серологической диагностики

ИФА основан на выявлении комплексов Аг-Ат при помощи маркирования одного из компонентов. В качестве метки используются различные ферменты, которые в результате ферментативной реакции образуют окрашивание. Существуют разнообразные методы ИФА, их можно классифицировать как гомогенные и гетерогенные методы.

Гомогенные означают, что все этапы реакции происходят в растворе.

Гетерогенные методы включают разделение на фазы с использованием твёрдого носителя.

Гомогенно-гетерогенные способы основываются на том, что комплексы Аг-Ат формируются в растворе, а затем для разделения используется твёрдая фаза.

Принцип «сэндвич»-метода

Существует множество вариаций методов ИФА, некоторые из них представлены ниже.

  1. Сэндвич-метод. К иммобилизованным Ат добавляется раствор с Аг, после образования комплексов носитель отмывают от лишних компонентов и добавляют маркированные Ат. В результате, Аг оказываются зажатыми иммобилизованными и мечеными Ат, откуда и произошло название метода.
  2. Неконкурентный непрямой ИФА. К иммобилизованным Аг присоединяют исследуемую сыворотку с Ат. Когда образуются комплексы, лишние Ат смывают и добавляют маркированные Ат, способные связаться с прикреплёнными к поверхностям лунок иммунными комплексами.
  3. Конкурентный прямой ИФА. К иммобилизованным Аг вносят исследуемую сыворотку и конъюгат, содержащий маркированные Ат. Формируются комплексы Аг-Ат нескольких видов: с мечеными Ат и с немаркированными Ат, которые вступают между собой в конкуренцию за связь с Аг.

Какие инфекции помогает выявить серологическое исследование

Серологическая диагностика позволяет выявить возбудителя

СИ позволяют выявить определённое заболевание при наличии на него подозрения, то есть в основе анализа лежит знание того, какой именно элемент необходимо искать.

Если у пациента присутствует определённая симптоматика либо иные исследования указывают на заболевание, назначается серологический анализ.

Серологические исследования используют для диагностики следующих инфекций:

  • вирус гепатита А, В, С, D, Е;
  • сифилис;
  • ВИЧ;
  • герпес;
  • цитомегаловирус;
  • краснуха;
  • корь;
  • паротит;
  • Эпштейн-Барр;
  • хеликобактер;
  • хламидии;
  • микоплазмы;
  • токсоплазмы;
  • лямблии;
  • гельминты;
  • уреаплазмы;
  • парвовирус;
  • вирус ветряной оспы;
  • вирус клещевого энцефалита;
  • вирус Денге;
  • коклюш;
  • боррелии;
  • легионеллы.

Серологические исследования способны выявить любые инфекции в лабораторных условиях, если в наличии есть Аг возбудителя инфекции.

Преимущества серологического метода исследования в диагностике инфекций

Серологическая диагностика — быстро и доступно

  1. Высокая чувствительность и специфичность.
  2. Широкий спектр определяемых инфекций.
  3. Ранняя диагностика инфицирования.
  4. Возможность мониторинга развития заболевания.
  5. Быстрота и удобство в исполнении.
  6. Возможность использования минимального объёма исследуемого материала.
  7. Безопасность исследования.
Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.